实验方案库
细胞热位移实验方案
本protocol描述了细胞热位移实验（Cellular Thermal Shift Assay, CETSA）的流程，通过蛋白质对热稳定性的不同相应，可在细胞裂解物或完整细胞中分析目标蛋白的完整性与溶解性，从而间接评估小分子化合物与靶蛋白的结合情况。
Co-IP 实验零基础教学
本protocol是面向零基础研究人员的免疫共沉淀（Co-IP）实验指南，可在非变性条件下捕获并验证生理状态下蛋白质之间的相互作用。通过使用特异性抗体沉淀目标蛋白及其结合蛋白，随后进行免疫印迹分析，从而证实蛋白间的直接或间接结合。
镍柱纯化标签蛋白
本protocol描述了一种镍柱纯化方法，也就是亲和层析（IMAC）。该方法利用组氨酸标签与镍离子的特异性结合，通过改变洗脱条件（咪唑浓度）将带有组氨酸标签（His-tag）的重组蛋白从杂蛋白中分离出来，是重组蛋白纯化的常用技术。
免疫荧光（IF）
本protocol描述了使用免疫荧光技术对细胞或组织样本中特定蛋白质的表达进行定位和半定量分析的实验流程。该方法通过荧光标记的特异性抗体与目标蛋白结合实现可视化，可在荧光显微镜下观察蛋白的亚细胞定位及表达水平。
免疫组化（IHC）
本protocol描述了使用免疫组化技术对组织切片中的特定蛋白进行定位和半定量分析的标准流程。该方法通过抗原-抗体特异性反应与化学显色，在显微镜下可视化目标蛋白在组织中的分布与表达水平。
磷酸化蛋白的Western Blot经验总结
本文总结了使用Western Blot技术检测和分析磷酸化蛋白表达水平的实验经验，介绍了诸多难点要点，如如何有效保持蛋白质磷酸化状态、优化实验条件以及提高检测特异性。
三种紫外吸收法测蛋白含量方法的对比分析
本文对比分析了三种基于紫外吸收原理的蛋白质定量方法：280nm直接测定法、280nm与260nm吸收差法和215nm与225nm吸收差法。与bradford等基于染色的方法不同，这三种方法仅使用分光光度计进行测定。老司机的计算器中有第二种方法的预设。
考马斯亮蓝染色
本protocol介绍的是使用考马斯亮蓝染色法对蛋白质进行定性和半定量分析的方法。考马斯亮蓝染料与蛋白质的碱性氨基酸结合产生蓝色复合物，对凝胶或膜上的蛋白质条带进行染色，可以检测蛋白质表达水平、纯化效果或电泳分离结果。
蛋白翻译后修饰对Western Blot实验结果的影响
本文介绍了一种在WB实验中常被忽略的影响因素：蛋白质翻译后修饰（如磷酸化、糖基化）对Western Blot实验结果的多种影响。
SDS-PAGE 和 PAGE 蛋白质电泳
本文介绍了SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）和PAGE（非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳）两种电泳技术，二者的关键差别在于SDS-PAGE中加入了使蛋白质变性的SDS。SDS-PAGE仅根据分子量大小分离蛋白质，而PAGE则是在非变性条件下根据蛋白质的电荷、大小和形状等进行分离。
Western Blot 常规全流程
本protocol描述了通过Western Blot技术检测特定蛋白质表达水平的标准流程。主要包括蛋白质样品制备、SDS-PAGE凝胶电泳分离、转膜、特异性一抗和二抗孵育，最后通过化学发光成像进行分析。
Western Blot常见问题分析与解决
本文针对Western Blot实验中可能遇到的常见问题，如无信号、高背景、非特异性条带等，以及如何选择内参、特定蛋白的处理方法等，提供系统的故障排查思路与解决方案，旨在帮助实验者优化实验条件，获得清晰可靠的结果。
Dot Blot 实验
本protocol描述的是Dot Blot技术，此法用于快速、半定量检测蛋白质与核酸水平。该技术将蛋白质样品直接点样于固相载体上，通过特异性抗体或探针与待测物进行杂交显色，得知目标分子是否存在
Bradford法测定蛋白质含量
本protocol描述了使用Bradford法测定溶液中蛋白质含量的标准流程。该方法的原理是考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质结合后产生蓝色复合物引起吸光度变化，通过在595 nm波长下进行比色分析来测定未知样品的蛋白质浓度。该法快速、灵敏且操作简便，适用于多种生物样品的蛋白质定量分析。