分子生物学

本实验方案详细描述了使用异丙醇沉淀法从植物组织中提取miRNA的完整流程。包括组织研磨、均质化、离心分离、异丙醇沉淀、洗涤纯化以及RNA的定量与定性分析等关键步骤，适用于植物样本中微小RNA的分离与制备。

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• 2026/1/22 123 17

本方案详细介绍了从血浆样本中分离外泌体，并进一步从分离得到的外泌体中提取总RNA的实验流程。该流程是进行外泌体相关分子生物学研究（如miRNA测序、表达分析）的关键前期步骤。

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• 2026/1/22 85 16

本文基于NEB技术文献，系统分析了使用超微量分光光度计测量核酸浓度和纯度时的影响因素与数据解读要点。重点探讨了低浓度样品的测量波动性、A260/A280与A260/A230在蛋白污染检测中的差异、RNA污染的检测灵敏度以及不同盐类污染物对读数的影响，旨在帮助实验者正确评估核酸样品质量。

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• 2026/1/22 86 19

本方案描述了如何选择变性或非变性的RNA琼脂糖凝胶电泳，以及详细步骤，包括RNA样品的处理、上样缓冲液的添加以及上样前的准备。

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• 2026/1/22 93 20

本文描述了进行酶联免疫吸附测定（ELISA）的标准流程，用于检测和定量样品中的特定蛋白质或抗体。通常包括包被、封闭、孵育、洗涤、显色和读数等关键步骤，是一种广泛应用于研究和诊断的免疫学技术。

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• 2026/1/21 82 31

本文旨在阐明Western Blot和qPCR两种常用分子生物学技术在实验重复设计上的核心区别，包括技术原理、重复类型（技术重复与生物学重复）的定义、应用场景以及数据分析层面的考量，为实验设计提供指导。

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• 2026/1/21 434 60

本protocol描述了使用荧光定量PCR（qPCR）技术检测微小RNA（miRNA）表达水平的实验方法。该方法通过特异性逆转录引物将miRNA反转录为cDNA，再利用TaqMan探针或SYBR Green染料进行定量PCR扩增，用于研究基因转录后调控机制。

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• 2026/1/21 81 20

本protocol描述了利用双荧光素酶报告基因系统研究基因转录调控的实验方法。通过共转染萤火虫荧光素酶报告基因质粒和海肾荧光素酶内参质粒到细胞中，并检测两种酶的活性，可以定量分析特定顺式作用元件或转录因子对目标基因启动子活性的影响。该系统通过内参校正，有效减少了实验误差。

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• 2026/1/21 155 32

本protocol描述了使用体外转染技术研究基因转录调控的实验方法。通过将外源DNA或RNA导入培养的细胞中，分析其对目标基因表达的影响，常用于启动子活性分析、转录因子功能验证等研究。

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• 2026/1/21 71 22

本protocol介绍了如何设计实验确定siRNA的作用浓度和作用时间，以优化基因敲低效率并减少脱靶效应。

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• 2026/1/21 218 31

本protocol描述了使用慢病毒作为载体系统感染靶细胞，以研究特定基因的转录调控机制的方法。通过构建携带报告基因或目的基因的慢病毒，感染细胞后分析基因表达变化。

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• 2026/1/21 179 39

本protocol描述了通过RNA干扰技术进行基因敲低，以研究特定基因在转录调控中功能的方法。通常包括设计合成siRNA、转染细胞、以及后续验证敲低效率和表型分析等关键步骤。

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• 2026/1/21 119 30

本protocol介绍了通过RNA干扰或CRISPR干扰等技术，在细胞或生物体水平上特异性降低或抑制目标基因的表达，以研究该基因在转录调控网络中的功能、对表型的影响以及与其他基因的相互作用的方法。

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• 2026/1/21 65 20

本protocol描述了通过构建过表达载体并转染至目标细胞，以实现特定基因的过表达，进而研究该基因在转录调控中功能的标准实验流程。适用于研究基因功能、信号通路及表型分析。

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• 2026/1/21 80 29

本protocol旨在通过生物信息学工具预测能与目的基因相互作用的miRNA及结合位点，并利用双荧光素酶报告基因实验等分子生物学方法对预测结果进行实验验证，以研究miRNA在基因转录调控中的作用。

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• 2026/1/21 62 24

本protocol介绍了利用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑，以研究特定基因的转录调控机制的实验流程。通过设计sgRNA靶向目标基因的调控区域，利用Cas9核酸酶引入双链断裂，通过细胞自身的修复机制实现基因敲除或修饰，进而分析其对转录活性的影响。

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• 2026/1/21 77 21

本文描述了利用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑，并通过抗生素筛选和单克隆化流程构建稳定转染细胞系的方法，用于后续的基因功能与转录调控研究。

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• 2026/1/21 67 20

本protocol描述了使用原位杂交技术检测组织或细胞中特定基因mRNA表达的方法。通过设计与目标基因互补的标记探针，与样本中的mRNA进行杂交，并通过显色或荧光信号进行定位和可视化，从而在形态学背景下分析基因的表达模式。

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• 2026/1/21 61 18

本文描述了使用荧光定量PCR技术对样本中特定mRNA的表达水平进行相对或绝对定量的标准流程。主要包括RNA提取、反转录合成cDNA、qPCR反应体系配制与程序运行，以及后续的数据分析步骤。

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• 2026/1/21 107 35

本protocol详细描述了用于RNA提取实验所需的各种缓冲液的配制方法，包括各种缓冲液、无RNase水、琼脂糖凝胶等关键试剂的配方、配制步骤及注意事项，确保RNA提取的质量和纯度。

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• 2026/1/21 65 14