流式细胞术

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本文档针对流式细胞术实验中常见的问题提供了系统的故障排查思路与解决方案，旨在帮助实验人员优化实验流程，获得可靠的数据结果。

本文描述了使用流式细胞仪从异质性细胞悬液中，基于细胞表面特异性抗原标记（如CD3、CD4、CD8），分选出高纯度T细胞亚群的方法。该技术是免疫学研究中获取特定细胞群体的关键手段。

本实验方案利用Annexin V-FITC与碘化丙啶（PI）联合染色，通过流式细胞术检测细胞凋亡。Annexin V特异性结合凋亡早期外翻的磷脂酰丝氨酸（PS），PI则标记膜完整性受损的中晚期凋亡或坏死细胞，从而区分不同状态的细胞群体。

本文介绍了流式细胞术数据分析的核心概念与基本流程，包括数据文件的获取、设门策略、荧光补偿调整以及结果解读，旨在帮助研究者掌握从原始数据中提取生物学信息的标准化方法。

本文阐述了在进行多色流式细胞术实验时，荧光染料选择与搭配的核心原则。内容涵盖光谱重叠补偿、荧光强度匹配、仪器配置考量等关键环节，旨在指导研究人员设计出高效、准确的多色荧光抗体组合方案，以同时检测细胞表面或内部的多个靶标分子。

本文档详细介绍了流式细胞术中多种来源样本的单细胞悬液制备方法，包括新鲜实体组织、石蜡包埋组织、培养细胞、外周血、骨髓、活检/内镜取材标本以及脱落细胞。针对每种样本类型，提供了具体的实验原理、材料、步骤和注意事项，旨在为流式细胞术分析提供合格的单细胞样本。

本文描述了使用流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平的方法。通过使用荧光探针（如DCFH-DA）标记细胞内的ROS，利用流式细胞仪进行定量分析，以评估细胞的氧化应激状态。该方法广泛应用于免疫学、细胞生物学和毒理学研究。

本实验方案详细介绍了利用碘化丙啶（PI）染色结合流式细胞术检测细胞周期分布的方法。通过测量细胞内DNA含量，将细胞群区分为G1/G0期、S期和G2/M期，并计算各阶段细胞百分比，以评估细胞增殖状态。方案涵盖了从细胞收集、固定、染色到上机检测及结果分析的全过程。

本文档介绍了流式细胞术的发展历程、基本原理和应用领域。流式细胞术是一种能够快速、准确地分析单个细胞多种特性的技术，通过激光照射和信号检测获取细胞信息，广泛应用于临床诊断、免疫学研究和药物筛选等领域。