细胞实验
RAW 264.7 细胞培养方案
本方案详细介绍了鼠源性单核巨噬细胞系RAW 264.7的培养、复苏、传代和冻存的标准操作流程。重点说明了该细胞的形态特征、应用领域、专用培养基配方以及培养过程中的关键注意事项,特别是避免细胞分化的操作要点。
HuH7细胞培养方法
本方案详细描述了人肝癌细胞系HuH7的常规培养流程,包括细胞复苏、传代、冻存及日常维持等关键操作,旨在为研究人员提供标准化的细胞培养技术指导,确保细胞处于良好的生长状态以满足后续实验需求。
Caco-2细胞培养方案
本方案详细介绍了人结直肠腺癌Caco-2细胞的培养方法,包括细胞简介、培养条件、细胞复苏、传代与冻存的标准操作流程及关键注意事项。Caco-2细胞在体外可自发分化为具有极性的上皮样细胞,是研究肠道吸收、药物渗透及转运蛋白相互作用的常用模型。
细胞培养理论基础与操作指南
本文档系统介绍了细胞培养的基本原理、无菌操作技术、耗材选择与灭菌方法,以及培养基的配制与选择。内容涵盖从原代培养到细胞系传代的关键概念,并详细阐述了在生物安全柜内进行规范操作、防止污染的具体要点,旨在为生命科学研究人员提供全面的细胞培养实践指导。
HCMEC/D3细胞培养方案
本方案详细介绍了人脑微血管内皮细胞系HCMEC/D3的培养方法,包括细胞背景、专用培养基配制、细胞复苏、传代和冻存的标准操作流程,以及培养过程中的关键注意事项。该细胞系可用于构建人血脑屏障模型,研究内皮细胞功能及药物转运机制。
细胞培养常见问题与解决方案
本文档系统性地总结了细胞培养中常见的微生物污染(细菌、真菌、支原体、黑胶虫)的识别特征、成因分析,并提供了预防污染和优化细胞状态的具体操作建议与注意事项。内容涵盖污染辨别、预防措施、实验操作技巧及常见问题解答,旨在帮助实验人员有效维护细胞健康,保障实验顺利进行。
细胞系的消化和传代
本方案详细描述了贴壁细胞和悬浮细胞传代的标准操作流程,重点介绍了使用胰酶消化贴壁细胞的关键步骤、技巧及注意事项,包括消化时间的控制、消化终止、细胞重悬、计数和分瓶培养等。
CHO-K1细胞培养方案
本方案详细介绍了中国仓鼠卵巢CHO-K1细胞的培养条件、复苏、传代和冻存的标准操作流程。CHO-K1细胞是生物制药领域常用的生产细胞系,本方案适用于在含血清培养基中进行贴壁培养的实验室常规操作。
MDA-MB-231细胞培养方案
本方案详细介绍了人类三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231的常规培养、传代、冻存与复苏操作流程。该细胞具有高迁移和侵袭性,常用于乳腺癌转移研究。方案涵盖了从培养基配制到具体操作步骤及关键注意事项的完整指南。
U87MG肿瘤细胞培养实验方案
本方案详细介绍了人胶质母细胞瘤细胞系U87MG的常规培养流程,包括细胞复苏、传代、冻存及培养过程中的关键注意事项,旨在维持细胞良好的生长状态并提供合格的实验材料。
HGC-27细胞培养方案
本方案详细介绍了人胃癌细胞系HGC-27的培养、复苏、传代和冻存的标准操作流程。HGC-27细胞是一种具有强侵袭性和增殖能力的低分化胃癌细胞模型,适用于胃癌分子机制、药物筛选及侵袭转移特性研究。方案包含了从细胞简介、培养条件到具体实验步骤及注意事项的完整内容。
THP-1细胞培养方案
本方案详细介绍了人急性单核细胞白血病细胞系THP-1的培养、复苏、传代、冻存标准操作流程及注意事项。THP-1细胞是研究单核/巨噬细胞相关机制的重要体外模型,方案涵盖了从培养基配制到细胞状态维护的全过程。
细胞计数和铺板
本实验方案详细介绍了细胞培养中细胞计数和铺板的标准操作流程。内容包括使用血球计数板进行细胞计数的具体步骤、细胞浓度的计算方法,以及两种不同的细胞铺板方法及其注意事项,旨在确保细胞实验的准确性和可重复性。
H22细胞培养方案
本方案详细介绍了小鼠肝癌细胞系H22的体外培养方法,包括细胞复苏、传代和冻存的标准操作流程。H22细胞为悬浮生长,具有快速增殖能力,广泛应用于肝癌基础研究与抗肿瘤药物开发。方案强调了无菌操作、细胞状态维持及关键注意事项。
细胞内一氧化氮 (NO) 检测
本实验方案介绍了使用比色法(Griess试剂法)检测细胞内一氧化氮(NO)含量的方法。通过检测细胞培养上清中亚硝酸盐(NO₂⁻)的浓度,间接反映NO水平。方案详细说明了标准品制备、样品处理、试剂添加、吸光度测定及标准曲线计算等步骤。
CHO细胞培养方案
本方案详细介绍了中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的培养、传代、冻存与复苏的标准操作流程。内容包括细胞特性简介、所需培养基与试剂、具体实验步骤以及关键注意事项,旨在为使用者提供一套完整、规范的CHO细胞体外培养与维持方案。
VSMC血管平滑肌细胞培养方法
本方案描述了血管平滑肌细胞(VSMC)的体外培养流程,包括细胞复苏、传代、冻存及常规维持等关键操作,旨在为心血管疾病研究提供稳定可靠的细胞模型。
提高细胞培养实验质量的经验汇总
本文汇总了细胞培养实验中的关键操作经验与质量控制要点,旨在帮助实验者规范操作流程、减少污染风险、维持细胞状态稳定,从而获得可靠且可重复的实验结果。
GC-1 spg 细胞培养方案
本方案详细介绍了小鼠精原细胞系GC-1 spg的培养、复苏、传代和冻存的标准操作流程。该细胞系来源于BALB/c小鼠睾丸,经SV40大T抗原永生化,呈上皮样贴壁生长,广泛应用于生殖生物学、环境毒素及药物毒性机制研究。
MLE-12细胞培养方法
本方案描述了小鼠肺上皮细胞系MLE-12的标准培养流程,包括细胞复苏、传代、冻存及日常维持等关键操作,适用于需要使用该细胞系进行肺部相关研究的实验人员。
人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养方法
本方案详细介绍了人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的体外培养、传代、冻存与复苏的标准操作流程,旨在为血管生物学研究提供稳定、健康的细胞来源。
使用Hoechst 33258检测支原体污染
本实验方案利用Hoechst 33258荧光染料对细胞培养物进行染色,通过荧光显微镜观察细胞核外的荧光信号,从而检测细胞培养中是否存在难以察觉的支原体污染。该方法基于支原体DNA与染料结合后产生特异性荧光的原理,是一种常用的细胞质量监控手段。
提高细胞培养实验质量的经验汇总
本方案汇总了细胞培养实验中的关键操作经验与质量控制要点,旨在帮助实验者规范操作流程、减少污染风险、维持细胞状态稳定,从而提升实验的可重复性与数据可靠性。
紫外线对培养基和血清的影响分析
本文探讨了在细胞培养前,将培养基、血清等试剂放入生物安全柜内进行紫外线照射是否会影响其生物活性。通过分析紫外线的灭菌原理(特别是UVC波段)及其穿透能力,指出在【瓶盖紧闭】的情况下,紫外线无法穿透塑料或玻璃瓶壁,因此不会破坏试剂内的有效成分。同时,文章也提醒了紫外线照射可能产生低浓度臭氧及其安全注意事项。
细胞线粒体膜电位检测
本实验方案使用JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位的变化,以评估细胞凋亡水平。通过荧光显微镜或流式细胞仪观察红色与绿色荧光的比例变化,反映膜电位的高低。方案详细说明了从细胞准备、染料配制、染色孵育到观察分析的完整流程及关键注意事项。
细胞冻存和复苏
本方案详细介绍了细胞培养中至关重要的细胞冻存与复苏操作。冻存旨在长期保存细胞株,防止其因传代次数增加而变异或老化,并规避实验风险。复苏则是将冻存细胞快速解冻并恢复生长的过程,其核心原理是“慢冻快融”,以避免冰晶对细胞造成损伤。方案涵盖了从冻存液配制、细胞收集、分装标记、逐步降温,到复苏前准备、快速化冻、细胞转移、离心培养及后续观察的完整流程与关键注意事项。
检测细胞死亡的实验方法汇总
本方案汇总了用于细胞表型分析中检测细胞死亡的多种常用实验方法,旨在为研究者提供全面的技术参考,以评估不同条件下细胞的存活与死亡状态。
细胞迁移与侵袭实验方案概述
本文档概述了细胞迁移和侵袭的基本概念、核心机制及常用研究方法。细胞迁移是细胞在化学或机械信号引导下的定向移动,涉及细胞骨架重组和信号通路调控。细胞侵袭则是在迁移基础上增加了穿透和降解细胞外基质(ECM)的能力,常见于肿瘤转移等病理过程。文档详细介绍了划痕实验、Transwell迁移/侵袭实验、3D模型及活细胞成像等多种实验技术。
小鼠原代骨髓来源的巨噬细胞提取
本协议描述了从小鼠骨髓中分离和培养原代巨噬细胞的方法。通过收集小鼠股骨和胫骨骨髓细胞,使用特定生长因子(如M-CSF)诱导单核细胞分化为巨噬细胞,以获得用于免疫学、炎症或感染研究的高纯度原代巨噬细胞。
Calcein-AM/PI双染测细胞活力/毒性
本实验方案采用Calcein-AM/PI双染法评估细胞活力和毒性。该方法基于细胞膜完整性和代谢活性,通过活细胞内的酯酶将Calcein-AM水解为绿色荧光的Calcein,而膜受损的死细胞则允许PI进入并结合DNA发出红色荧光,从而区分活细胞、死细胞及受损细胞。