实验方案库
慢病毒感染实验
本protocol描述了使用慢病毒作为载体系统感染靶细胞，以研究特定基因的转录调控机制的方法。通过构建携带报告基因或目的基因的慢病毒，感染细胞后分析基因表达变化。
双荧光素酶报告基因系统
本protocol描述了利用双荧光素酶报告基因系统研究基因转录调控的实验方法。通过共转染萤火虫荧光素酶报告基因质粒和海肾荧光素酶内参质粒到细胞中，并检测两种酶的活性，可以定量分析特定顺式作用元件或转录因子对目标基因启动子活性的影响。该系统通过内参校正，有效减少了实验误差。
GC-1 spg 细胞培养方案
本方案详细介绍了小鼠精原细胞系GC-1 spg的培养、复苏、传代和冻存的标准操作流程。该细胞系来源于BALB/c小鼠睾丸，经SV40大T抗原永生化，呈上皮样贴壁生长，广泛应用于生殖生物学、环境毒素及药物毒性机制研究。
MLE-12细胞培养方法
本方案描述了小鼠肺上皮细胞系MLE-12的标准培养流程，包括细胞复苏、传代、冻存及日常维持等关键操作，适用于需要使用该细胞系进行肺部相关研究的实验人员。
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养方法
本方案详细介绍了人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的体外培养、传代、冻存与复苏的标准操作流程，旨在为血管生物学研究提供稳定、健康的细胞来源。
使用Hoechst 33258检测支原体污染
本实验方案利用Hoechst 33258荧光染料对细胞培养物进行染色，通过荧光显微镜观察细胞核外的荧光信号，从而检测细胞培养中是否存在难以察觉的支原体污染。该方法基于支原体DNA与染料结合后产生特异性荧光的原理，是一种常用的细胞质量监控手段。
提高细胞培养实验质量的经验汇总
本方案汇总了细胞培养实验中的关键操作经验与质量控制要点，旨在帮助实验者规范操作流程、减少污染风险、维持细胞状态稳定，从而提升实验的可重复性与数据可靠性。
紫外线对培养基和血清的影响分析
本文探讨了在细胞培养前，将培养基、血清等试剂放入生物安全柜内进行紫外线照射是否会影响其生物活性。通过分析紫外线的灭菌原理（特别是UVC波段）及其穿透能力，指出在【瓶盖紧闭】的情况下，紫外线无法穿透塑料或玻璃瓶壁，因此不会破坏试剂内的有效成分。同时，文章也提醒了紫外线照射可能产生低浓度臭氧及其安全注意事项。
Western Blot 常规全流程
本protocol描述了通过Western Blot技术检测特定蛋白质表达水平的标准流程。主要包括蛋白质样品制备、SDS-PAGE凝胶电泳分离、转膜、特异性一抗和二抗孵育，最后通过化学发光成像进行分析。
缓冲液配制与感受态细胞制备
本文详细介绍了用于分子克隆实验的缓冲液配制方法，以及通过化学转化法制备大肠杆菌感受态细胞的完整流程。包括溶液配制、细胞培养、冰浴处理、热激转化等关键步骤，适用于质粒转化等基础分子生物学实验。
细胞培养用缓冲液配制方法
本文详细介绍了用于细胞培养实验的常用缓冲液（如PBS、HEPES等）的配制步骤与注意事项，确保溶液无菌、pH精确且成分准确，以满足细胞维持、传代或实验处理的需求。
实验后蛋白相互作用分析
本文描述了在完成相关实验（如免疫共沉淀、酵母双杂交、Pull-down等）后，对获得的蛋白质样品进行相互作用验证和分析的流程。通常包括样品处理、电泳分离、免疫印迹检测及数据分析等步骤，旨在确认蛋白质间的直接或间接结合关系。
流式细胞术检测细胞凋亡
本实验方案利用Annexin V-FITC与碘化丙啶（PI）联合染色，通过流式细胞术检测细胞凋亡。Annexin V特异性结合凋亡早期外翻的磷脂酰丝氨酸（PS），PI则标记膜完整性受损的中晚期凋亡或坏死细胞，从而区分不同状态的细胞群体。
细胞线粒体膜电位检测
本实验方案使用JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位的变化，以评估细胞凋亡水平。通过荧光显微镜或流式细胞仪观察红色与绿色荧光的比例变化，反映膜电位的高低。方案详细说明了从细胞准备、染料配制、染色孵育到观察分析的完整流程及关键注意事项。
细胞冻存和复苏
本方案详细介绍了细胞培养中至关重要的细胞冻存与复苏操作。冻存旨在长期保存细胞株，防止其因传代次数增加而变异或老化，并规避实验风险。复苏则是将冻存细胞快速解冻并恢复生长的过程，其核心原理是“慢冻快融”，以避免冰晶对细胞造成损伤。方案涵盖了从冻存液配制、细胞收集、分装标记、逐步降温，到复苏前准备、快速化冻、细胞转移、离心培养及后续观察的完整流程与关键注意事项。
免疫组化（IHC）
本protocol描述了使用免疫组化技术对组织切片中的特定蛋白进行定位和半定量分析的标准流程。该方法通过抗原-抗体特异性反应与化学显色，在显微镜下可视化目标蛋白在组织中的分布与表达水平。
DHA对高脂饮食小鼠的代谢干预实验
本实验研究二十二碳六烯酸（DHA）对高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型的代谢干预效果。通过给小鼠喂食高脂饲料建立模型，并补充DHA，随后检测其体重、血糖、血脂及相关组织病理学变化，以评估DHA对代谢紊乱的改善作用。
小鼠皮肤组织蛋白提取
本协议描述了从小鼠皮肤组织中提取总蛋白的实验方法，适用于后续的蛋白质印迹、ELISA等蛋白质分析。流程包括组织样本的获取、清洗、匀浆裂解、离心及蛋白浓度测定等关键步骤。
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳是一种用于分离、鉴定和纯化DNA片段的常用分子生物学技术。其原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶基质中，在电场作用下根据分子量大小和带电荷量进行迁移和分离。该技术操作简便，是分子克隆、PCR等实验的验证手段。
流式数据分析基础知识
本文介绍了流式细胞术数据分析的核心概念与基本流程，包括数据文件的获取、设门策略、荧光补偿调整以及结果解读，旨在帮助研究者掌握从原始数据中提取生物学信息的标准化方法。
流式细胞术的多色荧光搭配原则
本文阐述了在进行多色流式细胞术实验时，荧光染料选择与搭配的核心原则。内容涵盖光谱重叠补偿、荧光强度匹配、仪器配置考量等关键环节，旨在指导研究人员设计出高效、准确的多色荧光抗体组合方案，以同时检测细胞表面或内部的多个靶标分子。
流式细胞术样本前处理：不同来源单细胞悬液制备方法
本文档详细介绍了流式细胞术中多种来源样本的单细胞悬液制备方法，包括新鲜实体组织、石蜡包埋组织、培养细胞、外周血、骨髓、活检/内镜取材标本以及脱落细胞。针对每种样本类型，提供了具体的实验原理、材料、步骤和注意事项，旨在为流式细胞术分析提供合格的单细胞样本。
Western Blot常见问题分析与解决
本文针对Western Blot实验中可能遇到的常见问题，如无信号、高背景、非特异性条带等，以及如何选择内参、特定蛋白的处理方法等，提供系统的故障排查思路与解决方案，旨在帮助实验者优化实验条件，获得清晰可靠的结果。
Co-IP 实验零基础教学
本protocol是面向零基础研究人员的免疫共沉淀（Co-IP）实验指南，可在非变性条件下捕获并验证生理状态下蛋白质之间的相互作用。通过使用特异性抗体沉淀目标蛋白及其结合蛋白，随后进行免疫印迹分析，从而证实蛋白间的直接或间接结合。
磷酸化蛋白的Western Blot经验总结
本文总结了使用Western Blot技术检测和分析磷酸化蛋白表达水平的实验经验，介绍了诸多难点要点，如如何有效保持蛋白质磷酸化状态、优化实验条件以及提高检测特异性。
链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠模型
本protocol介绍了使用链脲佐菌素（STZ）诱导小鼠产生高血糖以建立1型糖尿病动物模型的标准操作流程。该模型可用于糖尿病及其并发症的病理机制研究和药物筛选。
分子克隆：基因获取
本protocol介绍了通过分子克隆技术获取目标基因的通用流程，包括从NCBI获取序列、设计引物、使用SnapGene优化引物、PCR扩增等关键步骤。
检测细胞死亡的实验方法汇总
本方案汇总了用于细胞表型分析中检测细胞死亡的多种常用实验方法，旨在为研究者提供全面的技术参考，以评估不同条件下细胞的存活与死亡状态。
镍柱纯化标签蛋白
本protocol描述了一种镍柱纯化方法，也就是亲和层析（IMAC）。该方法利用组氨酸标签与镍离子的特异性结合，通过改变洗脱条件（咪唑浓度）将带有组氨酸标签（His-tag）的重组蛋白从杂蛋白中分离出来，是重组蛋白纯化的常用技术。
Pull-down 实验
本protocol描述了一种主流蛋白质相互作用的研究方法。将目的蛋白结合特定标签如GST或His等，与感兴趣的蛋白相互作用形成复合物，最后通过亲和层析等方法从细胞裂解液中捕获并验证与其相互作用的靶蛋白的实验流程。这是一种体外验证或发现蛋白质间直接相互作用的重要技术。