实验方案库
荧光定量PCR (mRNA)
本文描述了使用荧光定量PCR技术对样本中特定mRNA的表达水平进行相对或绝对定量的标准流程。主要包括RNA提取、反转录合成cDNA、qPCR反应体系配制与程序运行，以及后续的数据分析步骤。
qPCR数据分析（ΔΔCt法）
本方案详细介绍了使用ΔΔCt法分析qPCR数据的步骤，适用于Bio-Rad仪器导出的原始数据。内容包括从原始数据提取、Ct值计算、ΔΔCt计算到相对表达量（2^-ΔΔCt）的转换，以及技术重复与生物学重复的处理和最终的统计作图。
细胞迁移与侵袭实验方案概述
本文档概述了细胞迁移和侵袭的基本概念、核心机制及常用研究方法。细胞迁移是细胞在化学或机械信号引导下的定向移动，涉及细胞骨架重组和信号通路调控。细胞侵袭则是在迁移基础上增加了穿透和降解细胞外基质（ECM）的能力，常见于肿瘤转移等病理过程。文档详细介绍了划痕实验、Transwell迁移/侵袭实验、3D模型及活细胞成像等多种实验技术。
RNA琼脂糖凝胶电泳
本方案描述了如何选择变性或非变性的RNA琼脂糖凝胶电泳，以及详细步骤，包括RNA样品的处理、上样缓冲液的添加以及上样前的准备。
苏木精-伊红染色法（HE染色）
苏木精-伊红染色法（HE染色）是组织学中最常用的染色方法，用于显示细胞核和细胞质的基本形态结构。苏木精将细胞核染成蓝紫色，伊红将细胞质和细胞外基质染成粉红色，便于在光学显微镜下观察组织结构和病理变化。
Bradford法测定蛋白质含量
本protocol描述了使用Bradford法测定溶液中蛋白质含量的标准流程。该方法的原理是考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质结合后产生蓝色复合物引起吸光度变化，通过在595 nm波长下进行比色分析来测定未知样品的蛋白质浓度。该法快速、灵敏且操作简便，适用于多种生物样品的蛋白质定量分析。
Dot Blot 实验
本protocol描述的是Dot Blot技术，此法用于快速、半定量检测蛋白质与核酸水平。该技术将蛋白质样品直接点样于固相载体上，通过特异性抗体或探针与待测物进行杂交显色，得知目标分子是否存在
SDS-PAGE 和 PAGE 蛋白质电泳
本文介绍了SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）和PAGE（非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳）两种电泳技术，二者的关键差别在于SDS-PAGE中加入了使蛋白质变性的SDS。SDS-PAGE仅根据分子量大小分离蛋白质，而PAGE则是在非变性条件下根据蛋白质的电荷、大小和形状等进行分离。
蛋白翻译后修饰对Western Blot实验结果的影响
本文介绍了一种在WB实验中常被忽略的影响因素：蛋白质翻译后修饰（如磷酸化、糖基化）对Western Blot实验结果的多种影响。
考马斯亮蓝染色
本protocol介绍的是使用考马斯亮蓝染色法对蛋白质进行定性和半定量分析的方法。考马斯亮蓝染料与蛋白质的碱性氨基酸结合产生蓝色复合物，对凝胶或膜上的蛋白质条带进行染色，可以检测蛋白质表达水平、纯化效果或电泳分离结果。
三种紫外吸收法测蛋白含量方法的对比分析
本文对比分析了三种基于紫外吸收原理的蛋白质定量方法：280nm直接测定法、280nm与260nm吸收差法和215nm与225nm吸收差法。与bradford等基于染色的方法不同，这三种方法仅使用分光光度计进行测定。老司机的计算器中有第二种方法的预设。
虾青素抗肝纤维化动物实验方案
本方案旨在通过建立肝纤维化动物模型，研究虾青素对肝纤维化的干预效果。实验首先通过给予实验动物特定诱导剂建立肝纤维化模型，并设置虾青素治疗组，通过检测血清学指标、肝组织病理学染色等方法评估小鼠模型的肝纤维化程度及虾青素的保护作用。
裸鼠皮下成瘤实验
本protocol介绍了在免疫缺陷裸鼠皮下接种肿瘤细胞以建立皮下移植瘤模型的标准化操作流程。该模型广泛用于评估肿瘤生长、药物疗效及肿瘤生物学研究。
小鼠机械性疼痛检测
本protocol介绍了在小鼠模型中进行机械性疼痛检测的方法。使用von Frey纤维丝或类似的机械刺激装置，定量检测其爪部对机械刺激的敏感性（机械性痛阈）。该检测常用于评估神经病理性疼痛、炎性疼痛模型以及镇痛药物的效果。
小鼠原代骨髓来源的巨噬细胞提取
本协议描述了从小鼠骨髓中分离和培养原代巨噬细胞的方法。通过收集小鼠股骨和胫骨骨髓细胞，使用特定生长因子（如M-CSF）诱导单核细胞分化为巨噬细胞，以获得用于免疫学、炎症或感染研究的高纯度原代巨噬细胞。
分子克隆：DNA提取及电泳鉴定
本protocol介绍了从细菌培养物中提取质粒DNA，并通过琼脂糖凝胶电泳对提取的DNA进行鉴定分析的标准操作流程。该流程是分子克隆中的基础步骤，用于获取和验证重组DNA。
SnapGene分子克隆操作指南
本指南详细介绍了使用SnapGene软件进行分子克隆实验的完整流程，包括载体构建、序列分析、酶切位点选择和虚拟克隆等关键步骤，旨在帮助研究人员高效、准确地设计和模拟分子克隆实验。
Western Blot 缓冲液配制方法
本文详细介绍了进行Western Blot实验所需的各种关键缓冲液的配制方法，包括但不限于电泳缓冲液、转膜缓冲液、封闭液和洗涤液等。这些缓冲液的准确配制是确保Western Blot实验成功、获得清晰可靠结果的基础步骤。
基因沉默
本protocol介绍了通过RNA干扰或CRISPR干扰等技术，在细胞或生物体水平上特异性降低或抑制目标基因的表达，以研究该基因在转录调控网络中的功能、对表型的影响以及与其他基因的相互作用的方法。
基因敲低
本protocol描述了通过RNA干扰技术进行基因敲低，以研究特定基因在转录调控中功能的方法。通常包括设计合成siRNA、转染细胞、以及后续验证敲低效率和表型分析等关键步骤。
荧光定量PCR检测miRNA表达
本protocol描述了使用荧光定量PCR（qPCR）技术检测微小RNA（miRNA）表达水平的实验方法。该方法通过特异性逆转录引物将miRNA反转录为cDNA，再利用TaqMan探针或SYBR Green染料进行定量PCR扩增，用于研究基因转录后调控机制。
流式细胞术检测活性氧（ROS）
本文描述了使用流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平的方法。通过使用荧光探针（如DCFH-DA）标记细胞内的ROS，利用流式细胞仪进行定量分析，以评估细胞的氧化应激状态。该方法广泛应用于免疫学、细胞生物学和毒理学研究。
ABI StepOne Plus PCR仪软件操作指南
本指南详细介绍了ABI StepOne Plus实时荧光定量PCR仪及其配套StepOne Software软件的操作流程，重点针对SYBR Green染料法进行实验设置、程序运行和数据导出。
流式细胞术检测细胞周期
本实验方案详细介绍了利用碘化丙啶（PI）染色结合流式细胞术检测细胞周期分布的方法。通过测量细胞内DNA含量，将细胞群区分为G1/G0期、S期和G2/M期，并计算各阶段细胞百分比，以评估细胞增殖状态。方案涵盖了从细胞收集、固定、染色到上机检测及结果分析的全过程。
流式细胞术原理
本文档介绍了流式细胞术的发展历程、基本原理和应用领域。流式细胞术是一种能够快速、准确地分析单个细胞多种特性的技术，通过激光照射和信号检测获取细胞信息，广泛应用于临床诊断、免疫学研究和药物筛选等领域。
细菌克隆形成（CFU）实验步骤
本方案描述了通过涂布或倾注平板法对细菌样品进行系列稀释、培养并计数菌落形成单位（CFU），以定量测定样品中活菌数量的标准微生物学方法。
Calcein-AM/PI双染测细胞活力/毒性
本实验方案采用Calcein-AM/PI双染法评估细胞活力和毒性。该方法基于细胞膜完整性和代谢活性，通过活细胞内的酯酶将Calcein-AM水解为绿色荧光的Calcein，而膜受损的死细胞则允许PI进入并结合DNA发出红色荧光，从而区分活细胞、死细胞及受损细胞。
CCK-8法测细胞增殖/毒性
本实验方案详细介绍了使用CCK-8试剂盒进行细胞增殖和毒性检测的方法。通过WST-8在活细胞线粒体脱氢酶作用下还原为呈现黄色的甲臜的原理，利用酶标仪测定450 nm吸光度，间接反映活细胞数量，用于评估药物作用效果、计算IC50及绘制生长曲线。方案包含贴壁与悬浮细胞两种操作流程及关键注意事项。
DiD标记外泌体细胞摄取实验
本实验方案介绍了一种通过使用亲脂性荧光染料DiD标记外泌体，并与靶细胞共孵育，以检测和分析细胞对外泌体的摄取情况的方法。这是一种常用的细胞表型分析技术，用于研究细胞间通讯和物质转运。
Transwell迁移实验（6孔板）
本方案使用6孔板Transwell小室进行细胞迁移能力分析，是一种常用的体外细胞表型研究方法。通过将细胞接种于上室，利用下室中的趋化因子诱导细胞迁移穿过聚碳酸酯膜，从而评估细胞的迁移潜能。