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本文旨在阐明Western Blot和qPCR两种常用分子生物学技术在实验重复设计上的核心区别，包括技术原理、重复类型（技术重复与生物学重复）的定义、应用场景以及数据分析层面的考量，为实验设计提供指导。

本protocol介绍了如何设计实验确定siRNA的作用浓度和作用时间，以优化基因敲低效率并减少脱靶效应。

琼脂糖凝胶电泳是一种用于分离、鉴定和纯化DNA片段的常用分子生物学技术。其原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶基质中，在电场作用下根据分子量大小和带电荷量进行迁移和分离。该技术操作简便，是分子克隆、PCR等实验的验证手段。

本protocol介绍了通过分子克隆技术获取目标基因的通用流程，包括从NCBI获取序列、设计引物、使用SnapGene优化引物、PCR扩增等关键步骤。

本文描述了使用荧光定量PCR技术对样本中特定mRNA的表达水平进行相对或绝对定量的标准流程。主要包括RNA提取、反转录合成cDNA、qPCR反应体系配制与程序运行，以及后续的数据分析步骤。

本方案详细介绍了使用ΔΔCt法分析qPCR数据的步骤，适用于Bio-Rad仪器导出的原始数据。内容包括从原始数据提取、Ct值计算、ΔΔCt计算到相对表达量（2^-ΔΔCt）的转换，以及技术重复与生物学重复的处理和最终的统计作图。

本protocol描述了使用荧光定量PCR（qPCR）技术检测微小RNA（miRNA）表达水平的实验方法。该方法通过特异性逆转录引物将miRNA反转录为cDNA，再利用TaqMan探针或SYBR Green染料进行定量PCR扩增，用于研究基因转录后调控机制。

本指南详细介绍了ABI StepOne Plus实时荧光定量PCR仪及其配套StepOne Software软件的操作流程，重点针对SYBR Green染料法进行实验设置、程序运行和数据导出。

本文介绍了使用焦碳酸二乙酯（DEPC）处理水和实验室耗材，以制备无核糖核酸酶（RNase-free）的实验环境的流程。该方法通过DEPC与RNase的不可逆反应抑制酶活性，是进行RNA相关实验（如RNA提取、RT-PCR）前的关键准备步骤。

本方案为QuantStudio 3 & 5系列实时荧光定量PCR仪配套软件的基础操作指南，涵盖软件安装、实验程序创建、运行设置及数据分析等核心流程，旨在帮助用户快速掌握仪器软件的使用方法。

本文档以Bio-Rad T-100型号PCR仪为例，介绍了普通PCR仪的标准操作流程，包括反应体系准备、程序设置、上机运行及反应后分析。同时详细列出了使用过程中的关键注意事项，如环境要求、样品处理、仪器维护等，旨在提供通用性操作参考。具体操作应以实验室设备的官方指南为准。